【研究領域課題番号】20H04524 (KAKENデータベースで見る）

【研究キーワード】

mRNA / in vivo CAR T / nanomedicine / immunotherapy / cancer

【研究種目】基盤研究(B)

【研究期間】2020-04-01 - 2023-03-31

【配分額】17,550千円 (直接経費: 13,500千円、間接経費: 4,050千円)

【研究分野】消化器内科学

【研究領域課題番号】17K09405 (KAKENデータベースで見る）

【研究キーワード】

腫瘍免疫 / MICA / 免疫療法 / 切断酵素 / 分泌 / 癌 / 免疫学

【研究成果の概要】

C型肝炎感染から肝臓癌を発生しやすい宿主因子としてMICA遺伝子の上流の一塩基多型を 以前に報告した。その際、肝癌になりやすい人はMICAの発現量が少ない（癌になっても腫瘍免疫を惹起することが出来ない）ことが推定された。しかし、MICAの発現制御は、転写レベルだけではなく、転写・翻訳語の切断による癌細胞表面からの離脱も挙げられる。本研究では、MICA蛋白の切断離脱を阻害する化合物を蛋白分解酵素阻害剤ライブラリーからFAAH阻害剤にその作用があることを同定した。FAAH阻害剤はTIMP3発現増強を介してMICA蛋白の切断を阻害した。この結果を応用すると腫瘍免疫の増強につながる可能性がある。

【研究の社会的意義】

本研究によって、肝癌発癌に関与する遺伝子であることが以前に同定されている自然免疫関連分子であるMICAの癌細胞表面からの切断分泌を阻害する化合物を同定できた。
MICA蛋白は癌細胞表面に表出されると "eat-me signal"として作用し、免疫応答を惹起するトリガーとなるが、癌細胞ではMICA蛋白を切断して上清に分泌させてしまう機能がある。本研究によってFAAH阻害剤がMICA蛋白の切断を阻害し、癌細胞表面に表出されたMICA蛋白の量を維持する機能があることが判明した。この知見を応用すれば、癌免疫を増強し、発がん抑制や癌治療の増強につながることが期待される。

【研究種目】基盤研究(C)

【研究期間】2017-04-01 - 2020-03-31

【配分額】4,680千円 (直接経費: 3,600千円、間接経費: 1,080千円)

【研究分野】小児外科学

【研究領域課題番号】17H04355 (KAKENデータベースで見る）

【研究キーワード】

小児がん / 免疫チェックポイント蛋白 / 免疫療法 / 腫瘍幹細胞 / ＰＤ－１ / ＰＤ－Ｌ１ / 免疫チェックポイント阻害 / 小児がん腫瘍幹細胞・微小転移細胞の増殖抑制 / 癌 / 外科 / 病理学

【研究成果の概要】

C3H系マウスに骨肉腫LM８細胞株を移植し、原発巣を切除して肺転移のみとした実験系で、免疫チェックポイント阻害（PD-L1抗体 、Tim-3抗体）とOX-40抗体による免疫系賦活を同時に行う免疫療法の効果を検討した。免疫療法群で有意な生存率の改善と肺転移巣の縮小が示された。原原発巣切除により免疫療法単独もしくは原発巣切除のみの場合よりも有意に高い生存率が得られ、この新規免疫療法の有用性が示された。神経芽腫細胞株移植モデルを用いた検討では免疫療法の効果が残存腫瘍細胞数に影響されることが示された。一方でヒト小児がん組織では化学療法前後とも免疫チェックポイント蛋白ならびに関連分子の発現は弱かった。

【研究の社会的意義】

従来、PD1,PDL1の発現や細胞表面抗原の変異が少ないために免疫チェックポイント蛋白阻害療法の効果に疑問がもたれていた小児がんで、免疫賦活を併用することでこの免疫療法が有用であることを示した点で大きな意義があると考える。また従来は原発巣の切除は転移装が制御された場合に適応とされていたが、免疫療法を組み合わせることにより、腫瘍残存量を基盤に小児がん集学的治療の組み立てを根幹から見直させる大きな意義をもつものと考えられた。

【研究種目】基盤研究(B)

【研究期間】2017-04-01 - 2021-03-31

【配分額】17,030千円 (直接経費: 13,100千円、間接経費: 3,930千円)

【研究分野】腫瘍診断学

【研究領域課題番号】15K14399 (KAKENデータベースで見る）

【研究キーワード】

高齢化 / がん / 敗血症 / 免疫療法 / 酵素阻害 / マクロファージ / マクロファージ活性化因子 / αガラクトサミニザーゼ / 酵素阻害剤 / αガラクトサミニダーゼ

【研究成果の概要】

O-結合型糖鎖の切断状況により一過性に機能するGcMAFの血中安定性向上により、がんに対する免疫応答の維持を期待できるため、αGalNase阻害による新しい免疫調節抗がん治療研究を行った。
阻害剤を用いて、ヒト肝がん由来株化細胞の粗酵素に対する阻害研究を行った結果、本酵素活性を認め、これに対して良好な阻害能を確認した。ヒトαGalNaseに対して阻害効果が認められたため、GcMAFの効果持続性改善に期待できる結果であると考えられる。また、GcMAFの糖鎖構造を質量分析装置を用いて解析した結果、微量ではあるもののαGalNAcが結合したGcMAFの存在を確認した。

【研究種目】挑戦的萌芽研究

【研究期間】2015-04-01 - 2017-03-31

【配分額】3,900千円 (直接経費: 3,000千円、間接経費: 900千円)

【研究分野】消化器内科学

【研究領域課題番号】26893183 (KAKENデータベースで見る）

【研究キーワード】

癌ワクチン / 胆道癌 / 免疫 / 免疫療法 / 癌 / シグナル伝達 / ペプチド癌ワクチン / 免疫制御 / 免疫学 / トランスレーショナルリサーチ

【研究成果の概要】

申請者らは既治療が不応となった胆道癌患者を対象としたカクテルペプチド癌ワクチン療法第Ⅱ相治験を行った。本臨床研究に使用するカクテルペプチドの一つOCV-105 はcDNA マイクロアレイ法による包括的ゲノム情報から膵癌、胆管癌組織に高頻度に発現する遺伝子として同定され、CTLを誘導し得るHLA-A2402 拘束性エピトープペプチドである。本試験で使用する他の二つ、エルパモチド、OCV-101はVEGFR1,2由来のHLA-A 拘束性エピトープペプチドであり、VEGF-Aの受容体である。この受容体を標的にしたCTLの誘導により血管新生の阻害および癌細胞の増殖・転移を阻害することが期待できる。

【研究の社会的意義】

癌ワクチン療法における免疫学的解析をおこなう予定である。癌ワクチン療法における免疫学的解析をおこなった研究は少なく、学術的意義や社会的意義の高いものになると思われる。

【研究種目】研究活動スタート支援

【研究期間】2014-08-29 - 2016-03-31

【配分額】780千円 (直接経費: 600千円、間接経費: 180千円)

【研究分野】消化器内科学

【研究領域課題番号】26460984 (KAKENデータベースで見る）

【研究キーワード】

MICA / 免疫療法 / 肝癌 / 自然免疫 / 癌 / NKG2D / NK細胞 / 核酸

【研究成果の概要】

当研究者らは、ゲノムワイドアソシエーションスタディ(GWAS)解析で、1394例のC型肝炎罹患者と5486例の非感染者のサンプルを用いてC型肝炎感染から肝臓癌を発生しやすい宿主因子としてMICA遺伝子の上流に位置するSNPを 同定し報告した（Nat Genet. 2011）。本研究ではmicroRNA25-106クラスターに由来するmicroRNAがMICA遺伝子の発現量を負に制御しうることを同定した。また、CRISPR-Cas9系を用いて Cas9に VP16の転写活性化ドメインを融合した蛋白を用いた遺伝子編集手法の応用によってMICA遺伝子座からの転写を10倍以上高めることに成功した。

【研究種目】基盤研究(C)

【研究期間】2014-04-01 - 2017-03-31

【配分額】4,810千円 (直接経費: 3,700千円、間接経費: 1,110千円)

【研究分野】消化器内科学

【研究領域課題番号】24790708 (KAKENデータベースで見る）

【研究キーワード】

腫瘍免疫学 / 細胞傷害性T細胞 / RNF43 / 免疫寛容 / 臨床試験 / 樹状細胞 / 癌 / 腫瘍免疫 / 活性化リンパ球 / 免疫療法 / 制御性T細胞 / 抗腫瘍免疫

【研究成果の概要】

本臨床試験への参加目標患者10名への免疫細胞（RNF43パルス樹状細胞、Tリンパ球）接種を完遂、重篤な有害事象発生なく、本療法は安全に実施可能であった。治療開始4、7週後の臨床効果判定では、各々9、6名で病状の安定化を、1、4名が進行を認めた。免疫学的評価ではシクロフォスファミド投与により末梢血中制御性T細胞数が有意に低下し、低下の程度が大きいほど良好な臨床効果を認め、血清IL-6, -10濃度が高い症例では臨床効果が認められず、効果予測因子となり得ると考えられた。また腫瘍抗原RNF43特異的T細胞応答と臨床効果間には有意な相関を認めた。以上より本免疫細胞療法の安全性と有用性が示唆された。

【研究種目】若手研究(B)

【研究期間】2012-04-01 - 2014-03-31

【配分額】4,160千円 (直接経費: 3,200千円、間接経費: 960千円)

【研究分野】外科学一般

【研究領域課題番号】14571127 (KAKENデータベースで見る）

【研究キーワード】

樹状細胞 / electroporation / RNA / Flt3L / 癌 / 免疫療法 / 遺伝子治療 / 骨髄非破壊的幹細胞移植

【研究成果の概要】

化学療法あるいは放射線による悪性腫瘍の治療は、一部の悪性腫瘍を除きその効果には限界がある。免疫療法は、腫瘍抗原を特異的に認識したリンパ球に腫瘍細胞を攻撃させることにより腫瘍を治療する方法である。しかし、治療効果は必ずしも期待されるほど高くはない。リンパ球が抗腫瘍効果を発揮するためには免疫能を増強するための何らかの工夫が必要であることを示す。樹状細胞は抗原提示能力が高く、抗原特異的なT細胞を誘導することが知られている。実際腫瘍抗原を樹状細胞に提示させることにより腫瘍に特異的な細胞傷害性T細胞を誘導することが可能である。癌抗原をコードしたRNAを樹状細胞にトランスフェクションすることにより、抗原提示を増強し、腫瘍抗原に得意的な細胞傷害性T細胞を誘導し治療を行うことは、対癌治療戦略の一つとして有望である。Flt3Lは樹状細胞の抗原提示能力を活性化させることが知られているが、今回、Flt3Lのプラスミドを用い、in vivoでの遺伝子移入に成功した。またRNAを樹状細胞へ効率的に導入・発現させるためのエレクトロポレーションの至適条件を決定できた。さらにLPSあるいはOK-432による樹状細胞の成熟化はトランスフェクトしたRNAからの発現を増強することを示した。RNAトランスフェクションは抗原タンパクの発現のみならずGM-CSFやINFαなどのサイトカインを樹状細胞内に発現させることにより樹状細胞の成熟化を誘導し、より強力な免疫療法への応用が期待される。

【研究種目】基盤研究(C)

【研究期間】2002 - 2003

【配分額】4,000千円 (直接経費: 4,000千円)