Discovery Sagaサイレントキーワード俯瞰

dog / cancer / immune checkpoint / oncolytic virotherapy / DNA vaccine / 犬 / 腫瘍 / 免疫 / ガン / 治療 / レオウイルス

犬の悪性腫瘍に対する新しい治療法の基盤を確立するために、レオウイルスを用いた腫瘍溶解性ウイルス療法、DNAワクチン、PD-1キメラ抗体の担ガン犬を用いた臨床試験を行なった。腫瘍溶解性ウイルス療法については、19頭の様々な腫瘍をもった犬に投与し、その臨床的な効果について検討でき、一部の症例において効果が認められた。DNAワクチンについては、マウスを用いてDNAワクチン増強効果を誘導できる系は樹立できなかった一方、臨床試験においては2頭において長期生存が認められた。PD-1キメラ抗体については、抗体作製から実際の症例の投与まででき、犬で初めてのPD-1抗体医薬ができた。

マクロファージ / 組織球性肉腫 / 犬 / イヌ / 腫瘍 / ヌードマウス / アポトーシス / 獣医学 / 癌 / 免疫 / がん / AIM / CD5L

マクロファージ由来の腫瘍である組織球性肉腫は、悪性度が高く治療法がまだ確立していない。本研究では、マクロファージが特異的に産生するタンパク質apoptosis inhibitor of macrophage (AIM)の転写活性が一部の臓器で高いこと、組織球性肉腫由来細胞株にAIM発現ベクターを導入すると細胞増殖の有意な抑制が認められることを明らかにした。さらに組換えイヌAIMを培養液中に添加するとAIM濃度依存的に死滅した。以上より、イヌAIMは組織球性肉腫細胞に対して用量依存的な殺細胞効果があることが示唆された。

犬 / がん / 癌幹細胞 / 自己複製能 / がん幹細胞 / 炎症性乳癌 / 横紋筋肉腫 / 乳癌

がん幹細胞は、自己複製能、多分化能、免疫不全マウスにおける高い腫瘍形成能を示す細胞集団と定義され、がん発症だけでなく、がん進展、再発、転移に重要な役割を果たすだけでなく化学療法に抵抗性を示すため、がん幹細胞を標的とした治療戦略は必要不可欠と考えられている。
本研究は、極めて病態進行が早く、効果的な治療法がない犬の難治性がんを対象とし、難治性がんのがん幹細胞の同定を行い、薬剤ライブラリーを用いてがん幹細胞の自己複製能を抑制する阻害剤を抽出し、がん幹細胞移植モデルマウスにおける抗腫瘍効果を評価した。その結果、mTOR阻害剤の抗癌幹細胞効果を明らかにし、獣医医療に有用な候補治療薬として同定された。

外科 / 上皮間葉化 / 犬 / 乳腺腫瘍 / TGF-β / Smad / 上皮間葉化現象 / 獣医学 / 癌 / 細胞・組織

犬乳腺腫瘍の悪性化機構における上皮間葉化現象(EMT)とその意義を明らかにするため、まず犬乳腺腫瘍自然発症例の組織サンプルを用いてEMT関連因子の免疫染色を行ったところ、乳腺腫ではEMTは見られない一方で乳腺癌でEMTが起こっていることが明らかとなった。犬乳腺腫瘍細胞株においてもEMT関連因子を検索したところ同一症例から分離された細胞株の中から、E-cadherin,β-cateninが高発現し上皮様の性質を示すCHMp13a株と、vimentin、N-cadherinが高発現し間葉様の性質を示すCHMp5b株が得られた。トランスウェルアッセイにより運動能、浸潤能を評価したところCHMp5b株は有意に高い運動能と浸潤能を示し、EMTと細胞の悪性度との関連が示唆された。より詳細に検討するためにこれら細胞株を用いTGF-β刺激によるEMT誘導実験を行ったところ、TGF-β刺激下でvimentinが一過性に誘導され、その発現動態はSmad2のリン酸化の動態と一致した。またTGF-β刺激EMT誘導による運動能と浸潤能の変化をxCELLigence systemにより経時的に評価したところ、EMT関連因子の発現動態と同様に運動能、浸潤能ともに一過性に上昇を認める結果となった。これらの結果からEMTが犬乳腺腫瘍の悪性化に関与していることが示唆されるもののEMTは不安定で動的なものであり、それには抑制性Smadの発現が関与している可能性が示唆された。今後はRNAiを用いEMTの制御を行いEMTと犬乳腺腫瘍の悪性化の関連を明らかにする実験を移植マウスモデルを用い進め、得られた知見を自然発症臨床例において確認する研究を継続していく予定である。

【研究分担者】
富張瑞樹	帯広畜産大学	畜産学部	准教授	(Kakenデータベース)
中川貴之	東京大学	大学院農学生命科学研究科(農学部)	准教授	(Kakenデータベース)

【研究分担者】
松木直章	東京大学	大学院農学生命科学研究科(農学部)	教授	(Kakenデータベース)
盆子原誠	日本獣医生命科学大学	獣医学部	教授	(Kakenデータベース)

【研究分担者】
落合和彦	日本獣医生命科学大学	獣医学部	准教授	(Kakenデータベース)
盆子原誠	日本獣医生命科学大学	獣医学部	教授	(Kakenデータベース)
石渡俊行	地方独立行政法人東京都健康長寿医療センター(東京都健康長寿医療センター研究所)	東京都健康長寿医療センター研究所	研究部長	(Kakenデータベース)

【研究連携者】
中川貴之	東京大学	農学生命科学研究科	準教授	(Kakenデータベース)
呰上大吾	日本獣医生命科学大学	獣医学部	准教授	(Kakenデータベース)
市川仁	独立行政法人国立がん研究センター	早期	探索臨床研究センター	ユニット長	(Kakenデータベース)
吉村久志	日本獣医生命科学大学	獣医学部	講師	(Kakenデータベース)

【研究協力者】
中平嶺	日本獣医生命科学大学	獣医学部	大学院生