【研究分野】医療系薬学

【研究領域課題番号】26670074 (KAKENデータベースで見る）

【研究キーワード】

薬剤反応性 / 免疫学 / 生体分子 / トランスレーショナルリサーチ

【研究成果の概要】

特異体質性副作用の発現には患者の遺伝背景の関与が想定され、アバカビル過敏症ではHLA-B*57:01とアバカビルの相互作用が免疫原性を示すことが報告されている。特異体質性副作用の発現が知られる7種類のHLA-B遺伝子型と薬物の組合せで同様の検証を行った結果、B*35:05とネビラピンのみでアバカビル同様の強固な相互作用が認められた。陰性対象との配列比較から抗原提示溝内へのネビラピンの結合が想定され、実際にネビラピン存在下で提示される抗原ペプチドの傾向が変化し、変性HLA蛋白質の巻戻し実験からも支持された。
一方で、B*15:02とカルバマゼピンを含む他の組合せでは更なる解析が必要と考えられた。

【研究種目】挑戦的萌芽研究

【研究期間】2014-04-01 - 2016-03-31

【配分額】3,770千円 (直接経費: 2,900千円、間接経費: 870千円)

【研究分野】産婦人科学

【研究領域課題番号】19659429 (KAKENデータベースで見る）

【研究キーワード】

外科 / 生体分子 / 細胞外マトリックス / テネイシン / 抗体療法 / 細胞間相互作用 / 抗がん剤 / トランスレーショナルリサーチ

【研究成果の概要】

抗テネイシン抗体と抗がん剤との併用療法による腫瘍抑制効果を検討した。
2008卵巣癌細胞をヌードマウス皮下に移植1週間目より以下の各週スケジュールに従って処理した。(1)抗テネイシン抗体(aTNC)は1匹1回当たり125μgを3日毎に腹腔注射した。(2)抗体投与スケジュールに合わせて、5FUは、15mg/kg、Docetaxel(Doc)は2mg/kg、Cisplatin(Cis)は30mg/m^2を、それぞれ単独投与と抗体との併用投与を行った。(3)7週目まで腫瘍成長を観察した。腫瘍重量の変化は、抗体投与日毎に腫瘍の大きさを測定し(腫瘍長径X(腫瘍短径)^2)÷2で計算して算出した。また、抑制率は、(1-T/C)X100%によって算出した。その結果、Cis、5FU及びDoc単独投与での腫瘍抑制率は、それぞれ32.25%、61.06%、24.12%であったが統計的な有意差は見られなかった。抗体との併用投与では、それぞれ24.87%、43.8%、69.68%であり、aTNC+Doc群では、有意な相乗効果が見られた。しかしながら、CisとDoc単独投与群及びaTNC+Cis群での抑制効果は、5週までは全く見られず5週以降で抑制効果が観察できた。更にCis投与群では、抑制効果が観察されたと同時期に体重減少も観察された。また、免疫染色によってCis投与が、2008腫瘍細胞のTNC発現を上昇させることが観察できた。
抗体との併用療法によって逆に抑制効果が減少した5FUとCis群では、抗がん剤によるTNCの発現上昇によるものと考えられた。また、単独では、十分な抑制効果を示さなかったDocが、抗体との併用によって高い腫瘍増殖抑制効果を示したことは、腫瘍の細胞増殖環境としてTNCが重要な役割を担っていることを示唆し、更に、この抗体療法は早くから腫瘍抑制効果を示すためQOLの維持においても効果的な治療法であることが期待できる。

【研究種目】萌芽研究

【研究期間】2007 - 2008

【配分額】3,200千円 (直接経費: 3,200千円)

【研究分野】外科学一般

【研究領域課題番号】18390355 (KAKENデータベースで見る）

【研究キーワード】

外科 / 生体分子 / 細胞外マトリックス / テネイシン / 抗体治療 / 細胞間相互作用 / 病理学 / トランスレーショナルリサーチ

【研究成果の概要】

癌細胞と周囲間質細胞との相互作用は、癌の成長、浸潤、転移に重要な役割を担っている。細胞外マトリックステネイシン-C(TNC)とテネイシン誘導因子(TIF)は、この相互作用を調整する細胞外環境調整因子として重要である。
本実験の目的は、癌の周囲微小環境を標的とした癌の成長を抑制する抗体治療法を確立することである。そこで本実験では、癌細胞[ヒト扁平上皮癌細胞(A431)、ヒトメラノーマ細胞(A375)、ヒト乳癌細胞(KPL1、KPL3C、KPL4)]の増殖、TNC遺伝子発現、EGF遺伝子発現に対する間質因子の影響について解析し、更に、ヒト卵巣癌細胞(2008)、A431、A375、KPL4をヌードマウスに移植した腫瘍に対する抗TNC抗体及び抗TIF抗体の腫瘍成長抑制実験を行った。
その結果、以下のことが分かった。
(1)間質細胞由来の液性因子(MFs;TIFを含む)は、培養下でTNCを産生しない癌細胞(A431、KPL4)のTNC遺伝子発現を誘導するが、自律的にTNCを発現しているA375のTNC発現を抑制した。(2)MFsは、KPL4に対して、TNC遺伝子と共にEGF受容体遺伝子の発現を誘導した。(3)癌細胞の増殖に関して、A431、KPL1、KPL3C及びKPL4では、作用の強弱はあるものの、MFsは、増殖を促進したが、A375は、この影響を受けなかった。
(4)腫瘍成長抑制実験では、両抗体とも用いたヒト癌細胞由来の腫瘍の成長を抑制した。このことより、生体内では、TNCとTIFは、腫瘍成長における癌細胞と周囲間質細胞の相互作用に重要な役割を担っている分子であることが示された。
以上、本実験の結果はTNCとTIFが、がん細胞と周囲間質細胞間の相互作用において中枢的役割を担っていることを示している。また、これらの分子を標的とした抗体治療は、腫瘍成長阻害に効果的な手段であると考えられる。

【研究種目】基盤研究(B)

【研究期間】2006 - 2007

【配分額】16,810千円 (直接経費: 15,700千円、間接経費: 1,110千円)

【研究分野】放射線科学

【研究領域課題番号】17659374 (KAKENデータベースで見る）

【研究キーワード】

放射線 / 遺伝子 / 生体分子 / トランスレーショナルリサーチ / Tc-99m / ジーンイメージング / アンチセンス / オリゴヌクレオチド / 遺伝子キャリヤー / 蛍光標識 / 融合イメージ

【研究成果の概要】

本研究は放射能(RI)と蛍光とで二重標識したアンチセンス、または、その類似体のオリゴヌクレオチド(AON)によって、核医学手法と光学的手法とによって得られた融合イメージを用いて、体内にある遺伝子の局在を精確に、非侵襲的に捉える方法を開発することを目的としている。〈RI+蛍光〉標識したAONの生体内での安定性を確認し、次に、目的遺伝子をイメージングするに充分の量だけAONが到達するためのキャリアー物質を選択する。核医学手法と光学的手法とを融合させる基本ソフトを完成させ、「遺伝子局在イメージング」の臨床応用への移行を意図している。
実験モデルとしては、多剤耐性を獲得した腫瘍を植え付けたマウスを用い、対象とする遺伝子は多剤耐性に関係している(mdr)をターゲットとした。最終年度は以下のような研究成果を得た。1.mRNAに対してアンチセンスシークエンスをもつオリゴヌクレオチにRIを標識して、これを特異的に腫瘍に集積させるドラッグデザイン(=プラットフォーム)を開発した(特許申請中)。2.上記のドラッグデザイン(Streptavidin:biotin:peptide:AON:Tc-99m)がmdrを過剰発現する腫瘍へin vitro、in vivoの双方において、特異的に集積することを確認した。3.上記のドラッグデザイン(Streptavidtn:biotin:peptide:AON:蛍光)がmdrを過剰発現する腫瘍へin vitro、in vivoの双方において、特異的に集積することを確認した。4.上記のドラッグデザイン(Streptavidin:biotin:peptide:AON:Tc-99m:蛍光)について検討中である。

【研究種目】萌芽研究

【研究期間】2005 - 2007

【配分額】3,600千円 (直接経費: 3,600千円)

【研究分野】消化器内科学

【研究領域課題番号】17390215 (KAKENデータベースで見る）

【研究キーワード】

細菌 / 生体分子 / トランスレーショナルリサーチ / 免疫学 / 炎症性腸疾患 / メモリー細胞 / マウス大腸炎モデル / プロバイオティクス / 自然免疫 / 制御性T細胞

【研究成果の概要】

炎症性腸疾患慢性化永続化における腸内細菌の関与を追究する目的にてCD4^+CD45RB^<high>細胞を免疫不全マウス(Rag-1^<-/->マウス)へ移入する慢性大腸炎モデルを用いて追究した。
(1)炎症大腸局所には腸炎惹起性CD4^+ CD44^<high> CD62L^-IL-7R^<high>メモリー細胞が存在し、再びSPF-Rag-1^<-/->マウスに移入すると大腸炎を再び発症したが、無菌-Rag-1^<-/->マウスでは発症しなかった。
(2)(1)にて腸炎発症(-)の腸炎惹起性免疫メモリー細胞移入無菌-Rag-1^<-/->マウスには、脾臓、リンパ節、骨髄にCD4+メモリー細胞が腸炎発症(+)の移入SPF-Rag-1^<-/->マウスに比し少数(20-35%)ながら存在していた。
(3)(2)(1)にて腸炎発症(-)の腸炎惹起性免疫メモリー細胞移入無菌-Rag-1^<-/->マウスをSPF環境下へ移行すると短期間に再び類似大腸炎を発症した。
(4)MyD88欠損CD4^+CD45RB^<high>細胞移入したSPF-Rag-1^<-/->マウスは正常マウスCD4^+D45RB^<high>細胞を移入したマウスに比し優位に腸炎の発症が軽度であった。
以上の結果より、腸炎惹起性CD4^+メモリーT細胞は腸内細菌のTLR刺激による直接的なシグナルによって調整を受けるものの、無菌下においても生存し得ることを明らかとした。このことは腸炎惹起性免疫メモリー細胞は腸内細菌以外の因子(例えばIL-7)によって生体内で維持される機構の存在が示唆された。さらに、いかなる腸内細菌が大腸炎慢性化に関わり、いかなる腸内細菌が大腸炎抑制に関わるかを追究することにより今後の炎症性腸疾患の治療戦略において極めて重要と考えられた。

【研究種目】基盤研究(B)

【研究期間】2005 - 2006

【配分額】11,400千円 (直接経費: 11,400千円)