肺上皮細胞のリプログラミング法の開発
【研究分野】呼吸器内科学
【研究キーワード】
リプログラミング / 遺伝子導入 / 肺上皮細胞 / 肺線維芽細胞 / 小細胞肺癌 / 非小細胞肺癌 / 肺線維症 / トランスクリプトーム / 転写因子 / 肺胞上皮細胞 / トランスクリプト―ム / 転写ネットワーク / 三次元培養 / 動物モデル
【研究成果の概要】
ヒトiPS細胞・皮膚線維芽細胞でエレクトロポレーションの条件検討を行い、低い細胞毒性と高い遺伝子導入効率が得られた。TTF-1・YAP/TAZ・FOXA2の発現ベクターを作成し、これらの強制発現により細胞分化誘導を試みた。TGF-beta・BMP-4・FGF-2のリガンドおよび阻害剤、脱メチル化剤やHDAC阻害剤の効果も検証した。肺上皮細胞培養に適した無血清培地を活用し、さらにコラーゲンゲルに包埋した肺線維芽細胞との共培養、三次元培養、air-liquid interfaceの培養法も組合せた。肺上皮細胞マーカー(SPC、CC10、FoxJ1)の発現上昇を定量的PCRで確認できた。
【研究代表者】
【研究協力者】 |
長瀬 隆英 | |
大島 光宏 | |
山口 洋子 | |
鈴木 洋 | |
堀江 真史 | |
野口 智史 | |
奥西 勝秀 | |
小野 直亮 | |
MICKE Patrick | |
KACZKOWSKI Bogumil | |
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【研究種目】基盤研究(C)
【研究期間】2014-04-01 - 2017-03-31
【配分額】4,940千円 (直接経費: 3,800千円、間接経費: 1,140千円)