Discovery Sagaサイレントキーワード俯瞰

子宮内膜 / シグナル伝達 / 脱落膜化 / 着床 / キナーゼ / 上皮間葉転換

本研究では,子宮内膜の増殖・分化に伴って活性化されるチロシンキナーゼSRCが関与する細胞内シグナル伝達経路を,主にプロテオミクスの手法を用いて分子レベルで解明し,着床ならびに妊娠成立・維持における役割を明らかにすることを目的とする.その研究のための主要なマテリアルとして,活性化型SRCのアデノウイルスベクターの作成を試みたが,最終的には作成には至っていない.しかし,内膜分化の指標となるレポーターのコンストラクト,不死化ヒト内膜細胞株, in vivo内膜再構成システムなど,諸実験に必要なその他の研究マテリアル・研究ツールの準備・作成・確立は行い得た.一方,内膜腺上皮の機能発現においては, N-カドヘリンの関与するepithelial mesenchymal transition(EMT)が重要な役割を担う可能性を示した.

子宮内膜 / 子宮内膜症 / シグナル伝達 / proteinase-activated receptor / TGFβ / IL-6 / IL-17 / MAPキナーゼ / Th17 / IL-8 / AMPキナーゼ / メトホルミン / 着床 / 自然免疫

子宮内膜とその関連疾患についてのシグナル伝達機構とその制御について臨床にフィードバックできる多くの貴重なデータを得ることができ、周辺の事項も含めて発展的に理解を深めることができた。子宮内膜症に関しては、発症機序について多くの新しい知見を得ることができ、さらに、アポトーシスやT細胞免疫に新たな分子標的を見出すことにより不妊症治療につながる新たな展開をもたらした。一方、正所性子宮内膜に関しては、月経周期にともなう組織学的変化を支える種々のシグナル伝達機構や、その制御異常による不妊症などについて多くの知見を得ることができた。

子宮内膜 / シグナル伝達 / チロシンリン酸化 / Srcキナーゼ / ヒストンアセチル化 / レドックス / シグナル伝達経路 / 分化 / 性ステロイドホルモン / 脱落膜 / チロシンキナーゼ / c-Src

本研究では、子宮内膜の多様な機能発現を担う細胞内シグナル伝達経路の解明を目的として、チロシンリン酸化、ヒストンアセチル化、酸化還元(レドックス)反応について検討し、以下の点を明らかにした。
1.リン酸化:内膜分化(脱落膜化)系において、種々の蛋白のリン酸化状態が変化すると同時に、src familyチロシンキナーゼのひとつであるc-Srcが活性化していた。活性化型c-Srcを認識する抗体clone 28を用いることにより、ヒト子宮内膜及び脱落膜において、分化に伴って活性化型の発現増強を検出した。次にsrc familyチロシンキナーゼの阻害剤を用いたところ、逆説的にc-Srcは活性化し、分化も促進された。阻害剤の特異性の限界を鑑み、c-Srcの野生体および一部の変異体を発現するadenovirusを作製し、内膜細胞に感染させてその発現を確認した段階である。一方、2次元電気泳動法によりチロシンリン酸化蛋白を網羅的に解析し、分化特異的なリン酸化スポットを約20種類同定した。また、齧歯類の脱落膜化においても、活性化型の発現が増強しており、現在c-Srcノックアウトマウスの内膜分化能を検討中である。
2.ヒストンアセチル化:脱アセチル化酵素阻害剤の内膜分化への影響を検討したところ、細胞・薬剤特異的に性ステロイド依存性分化を促進した。その際、一部のコアヒストンの特定の部位がアセチル化されていた。
3.レドックス反応:内膜の増殖・分化の際、レドックス環境を調節するチオレドキシンが誘導された。分化過程では細胞外へ放出され、paracrine/autocrineに増殖を調節する可能性が示された。
内膜機能発現には、様々な蛋白修飾を通じたシグナル伝達経路の活性化が重要であることが示唆された。雌性生殖器官疾患に対して、シグナル伝達を標的にした創薬および治療開発の可能性を示唆する研究成果が得られた。

【研究分担者】
大須賀穣 (大須賀穰)	東京大学	医学部附属病院	講師	(Kakenデータベース)
百枝幹雄	東京大学	医学部附属病院	講師	(Kakenデータベース)
矢野哲	東京大学	医学部附属病院	准教授	(Kakenデータベース)
藤井知行	東京大学	医学部附属病院	准教授	(Kakenデータベース)

【研究分担者】
田中守	慶應義塾大学	医学部	助手	(Kakenデータベース)
末岡浩	慶應義塾大学	医学部	助教授	(Kakenデータベース)
丸山哲夫	慶應義塾大学	医学部	助手	(Kakenデータベース)
久慈直昭	慶應義塾大学	医学部	講師	(Kakenデータベース)
宮崎豊彦	慶應義塾大学	医学部	講師	(Kakenデータベース)