【研究分野】細胞生物学

【研究領域課題番号】15K14506 (KAKENデータベースで見る）

【研究キーワード】

膜脂質 / 電子顕微鏡

【研究成果の概要】

生体膜の基盤を形成する燐脂質は親水性頭部と疎水性尾部からなり、後者を作るアシル基は多種多様であることが知られている。しかしそれらのアシル基が生体膜中でどのような分布をとるのかはほとんど分かっていない。今回の研究ではアルキン基を付加した脂肪酸を取りこませた細胞を用い、急速凍結・凍結割断レプリカ法と組み合わせて、特定のアシル基の分布をナノレベルで明らかにする方法の開発を行った。凍結割断レプリカ上でクリック反応を行うことにより、特定のアシル基が細胞内のオルガネラ膜で観察され、またその膜中の限られた部分でクラスターを形成することが明らかになった。

【研究種目】挑戦的萌芽研究

【研究期間】2015-04-01 - 2017-03-31

【配分額】3,900千円 (直接経費: 3,000千円、間接経費: 900千円)

【研究分野】解剖学一般(含組織学・発生学)

【研究領域課題番号】15H02500 (KAKENデータベースで見る）

【研究キーワード】

膜脂質 / 脂肪滴 / オートファジー / 核膜 / 肝細胞 / 凍結割断レプリカ法 / 脂質ドメイン / リポファジー / 電子顕微鏡

【研究成果の概要】

ホスファチジルイノシトール3,5-二燐酸、ホスファチジルイノシトール3,4-二燐酸、ホスファチジルセリンについて、急速凍結・凍結割断レプリカ標識法で特異的かつ高効率に標識する方法を確立し、それぞれの脂質の詳細な細胞内分布の観察に成功した。肝細胞などの核内に見られる脂肪滴の形成にPML-IIの発現が必要であることを示し、核内脂肪滴がPML小体や核内に見られる核膜の延長構造と近接して分布することを明らかにした。静止期や窒素飢餓時の出芽酵母で見られる脂肪滴のミクロオートファジーがラフト様膜ドメインで起こり、ニーマンピック病Ｃ型タンパク質がドメイン形成に必要なステロール輸送に関与することを示した。

【研究種目】基盤研究(A)

【研究期間】2015-04-01 - 2018-03-31

【配分額】46,540千円 (直接経費: 35,800千円、間接経費: 10,740千円)