マラリア原虫のミトコンドリアリボソームにおける低コストな翻訳機構の解明
【研究キーワード】
マラリア原虫 / ミトコンドリアリボソーム / リボソームタンパク質 / アフィニティ精製 / ミトコンドリア / 翻訳
【研究成果の概要】
遺伝情報に基づいたタンパク質の合成は、全ての生物において生命活動の根幹をなす生体反応である。リボソームはこのタンパク質合成のプロセスである翻訳を担うRNA-タンパク質の複合体である。ATP産生の際に重要な細胞小器官であるミトコンドリアにも独自のリボソーム(mtリボソーム)が存在し、生物種種間で構造が多様であることが知られている。これまでのところ、マラリア原虫には41個のmtリボソームタンパク質の存在が推定されているが、この数は、82個のタンパク質で構成されているヒトのmtリボソームと比べると極めて少ない。また、同原虫のミトコンドリアDNAには、3つのタンパク質がコードされるのみであり、tRNAは存在しない。本研究は、最小限構成の翻訳機構を備えていると考えられるマラリア原虫のmtリボソームを用いて、mtリボソームの多様化機序の一端を明らかにすることを目的としている。今年度は、in vitro培養が可能なヒト熱帯熱マラリア原虫を用いたmtリボソームのアフィニティカラム精製(Tandem affinity purification, TAP)法のための標識付加組換え原虫の作製、および、作製した組換え原虫の溶解液を用いたウェスタンブロットの検討を行った。その結果、mtリボソームを構成するタンパク質のうち、大サブユニットに含まれるリボソームタンパク質L13および小サブユニットに含まれるS17にそれぞれ2種類の標識タンパク質(プロテインAおよびカルモジュリン結合ペプチド)を付加した原虫が作製できた。また、ウェスタンブロットにより標識タンパク質の発現が確認できた。以上の成果によって、次年度に予定しているマラリア原虫のmtリボソームのカラム精製が実施可能となった。
【研究代表者】
【研究分担者】 |
渡邊 洋一 | 東京大学 | 大学院医学系研究科(医学部) | 准教授 | (Kakenデータベース) |
稲岡 健ダニエル | 長崎大学 | 熱帯医学研究所 | 准教授 | (Kakenデータベース) |
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【研究種目】基盤研究(C)
【研究期間】2020-04-01 - 2023-03-31
【配分額】4,420千円 (直接経費: 3,400千円、間接経費: 1,020千円)