オートファゴソーム外膜因子の同定と膜融合過程の解析
【研究分野】細胞生物学
【研究キーワード】
オートファジー / 膜融合 / SNARE / プロテオーム / 膜動態
【研究成果の概要】
オートファゴソームとリソソームの膜融合に関わる因子を同定するため、オートファゴソーム外膜因子の網羅的同定を行った。STX17変異体過剰発現、OptiPrep密度勾配遠心、LC3を標的とした短時間精製を組み合わせることでオートファゴソームを高純度・高効率に精製する方法を確立した。水溶性ビオチン化試薬で外膜因子を特異的に修飾・精製した後、質量分析に供することで複数の外膜因子候補を得た。これらの因子についてCRISPR法での遺伝子破壊細胞の作製、およびsiRNA法でのタンパク質量抑制を行ったがオートファジー活性への影響は限定的でリソソームとの膜融合に関わる因子の同手には至っていない。
【研究代表者】
【研究連携者】 |
| 水島 昇 | 東京大学 | 大学院医学系研究科 | 教授 | (Kakenデータベース) |
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【研究協力者】 |
| 植松 真章 | 東京大学 | 大学院医学系研究科 | 大学院生 |
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【研究種目】挑戦的萌芽研究
【研究期間】2016-04-01 - 2018-03-31
【配分額】3,770千円 (直接経費: 2,900千円、間接経費: 870千円)