アンチセンスプローブを用いた生きた細胞のmRNAイメージング
【研究分野】分子生物学
【研究キーワード】
RNA / イメージング / 生細胞 / mRNA / アンチセンスプローブ / 蛍光イメージング
【研究成果の概要】
本研究では、線形アンチセンスプローブを用いたmRNAのイメージングにより翻訳調節や分解の解析を目指した。まず、生細胞内でプローブが優れた結合カイネティクスを有することを発見し、ストレスを受けた際に内在性mRNAが速やかにストレス顆粒へ局在化する過程を観察した。続いて、任意のmRNAに対するプローブ開発を行った。まず、mRNAの予測二次構造を参考にして設計したプローブに対し、細胞内拡散に着目してmRNAとの結合を定量的に評価した結果、標的mRNAと結合しうる複数のプローブを得た。さらに、プローブの結合率や解離定数を定量化し、内在性GAPDH mRNAのイメージングと発現量の定量解析を行った。
【研究代表者】
【研究連携者】 |
船津 高志 | 東京大学 | 大学院薬学系研究科 | 教授 | (Kakenデータベース) |
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【研究種目】基盤研究(C)
【研究期間】2011 - 2013
【配分額】5,330千円 (直接経費: 4,100千円、間接経費: 1,230千円)